一、 前言 酵母粉是酵母没有经过分解,但酵母浸粉的营养物质得到过分解的物质,微生物吸收利用的速度和效率更高,发酵残留少, 凭借其优点在传统的抗生素等发酵行业应用较广泛。本实验根据食品安全国家标准《GB/T 5009.235-2016 食品中氨基酸态氮的测定》中对于酵母粉中氨基酸态氮含量进行测试,采用电位滴定法检测酵母粉中氨基酸态氮含量, 具有操作简单, 结果准确, 精度高等优点。 二、仪器与试剂 2.1、仪器 JH-T7全自动电位滴定仪, 复合 PH 电极, 容量瓶, 分析天平等 2.2、试剂 c=0.1mol/L 的 NaOH 标准滴定液, 甲醛溶液(37%) , 去离子水 三、 实验方法 3.1、实验过程 3.1.1. 准备过程:用 PH=4.01、6.86、9.18 的缓冲液校对 PH 电极。 3.1.2. 空白实验测试: 加入 50mL 去离子水(保证溶液高度没过电极) 于滴定杯中, 放置电位滴定台上, 开启搅拌, 使样品混合均匀。启动编辑好氨基酸态氮空白测定的方法, 先滴定至 PH=8.2, 加入10mL 甲醛溶液(在方法中设置仪器可以自行添加甲醛),再滴定至 PH=9.2,记录由 PH=8.2 到PH=9.2消耗的氢氧化钠的滴定体积, 此为空白体积。 3.1.3. 酵母粉和蛋白胨测试过程: 准确称取 5g 待测试样于 100mL 容量瓶中, 用去离子水溶解, 定容 至刻度线等待测试。用 5mL 移液管准确移取溶解好的试样 5mL 置于滴定杯中, 加 50mL(保证溶液高度没过电极) 的去离子水, 放置电位滴定台上, 开启搅拌, 使样品混合均匀。启动编辑好的方法,先滴定至 PH=8.2,加入 10mL 甲醛溶液(在方法中设置仪器可以自行添加甲醛), 再滴定至 PH=9.2,记录由 PH=8.2 到 PH=9.2 消耗的氢氧化钠的滴定体积, 减去步骤 2)测试的空白体积, 计算样品的氨基酸态氮含量。
3.2、仪器参数如表所示: 表 1 氨基酸态氮测定滴定仪参数设置 滴定类型: | 终点滴定 | 方法名: | 氨基酸态氮含量测定 | 滴定管体积: | 10mL | 样品计量单位: | g | 工作电极: | PH 复合电极 | 参比电极: | 无 | 搅拌速度: | 7 | 预搅拌时间: | 5s | 快滴平衡时间: | 4s | 快滴平衡电位: | 1mv | 慢滴平衡时间: | 6s | 慢滴平衡电位: | 1mv | 慢滴体积: | 0.02mL | 快滴体积: | 0.5mL | 滴定前平衡电位: | 10mV | 结束体积: | 20mv | 终点值 1(PH): | 8.2(延时 10s) | 预控值: | 7 | 终点值 2(PH): | 9.2(延时 10s) | 预控值: | 8 | 相关系数: | 1.4 | 结果单位: | g/100g | 滴定剂名称: | 氢氧化钠 | 理论浓度: | 0.1 | 辅助试剂: | 甲醛 | 添加体积: | 10mL | 参考终点: | 1 | 添加时间: | 滴定中 |
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