1. 前言平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或向右旋转,旋转的度数称为旋光度。在一定波长与温度下,偏振光透过每 1 mL 含 1 g 旋光性物质的溶液且光路长度为 1 dm 时测得的旋光度称为比旋度。比旋度是光学活性物质的特征物理常数,可用于物质的鉴别、纯杂程度检查及含量测定,是糖类、氨基酸及手性化合物质量控制中的检测项目之一。 D-阿洛酮糖是一种新型稀有单糖,被业界评价为潜力的蔗糖替代品,具有调节血糖、预防成人病等重要生理功能;D-塔格糖是以乳糖为原料制得的天然新型单糖,为果糖的差向异构体,甜度约为同量蔗糖的 92%,是一种低能量甜味剂与填充剂,并具有抑制高血糖、改善肠道菌群、不致龋齿等多种生理功效,广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。旋光度是这类光学活性糖类的重要物理常数,直接反映其光学纯度与构型,是功能性糖原料质控与产品开发的关键指标。 《中国药典》2025 年版四部通则 0621 旋光度测定法规定:除另有规定外,采用钠光谱 D 线(589.3 nm)测定,测定管长度 1 dm,测定温度 20 ℃,使用读数至 0.01° 并经检定的旋光计;供试品溶液一般应在配制后 30 分钟内完成测定,每次测定前后应以溶剂作空白校正。上海佳航 AIpol-P630 数字旋光度测定仪参照该通则研发设计,采用 LED 冷光源与半导体帕尔贴控温,可稳定、准确地完成功能性糖比旋度的测定。 2. 实验准备2.1 实验仪器• 上海佳航 AIpol-P630 数字旋光度测定仪(帕尔贴控温、LED 冷光源、10.1 寸触摸屏) • 分析天平(分度值 0.1 mg) • 100 mL 容量瓶、移液管、烧杯 • 旋光管:100 mm 控温型 / 普通型(按需要选用) • 纯化水、擦镜纸、无尘纸 2.2 实验样品• D-阿洛酮糖(食品原料) • D-塔格糖(食品原料) 2.3 执行标准• 《中华人民共和国药典》2025 年版 四部 通则 0621 旋光度测定法 • 功能性糖相关产品标准及企业内控质量标准 • GB 5009 系列 食品安全国家标准(理化检验基本原则) 3. 测试方法3.1 溶液配制分别准确称取 D-阿洛酮糖、D-塔格糖样品约 10 g(精确至 0.0001 g),各置 100 mL 容量瓶中,加适量纯化水溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度约 0.1 g/mL 的供试液。配制及测定时均应调节温度至 20.0 ℃ ± 0.5 ℃。 3.2 仪器参数设置项目 | 设置 | 结果类型 | 比旋度 | 测量模式 | 高精确测量 | 显示位数 | 3 位(最小读数 0.0001°) | 测试温度 | 20.0 ℃(帕尔贴控温,控温精度 ±0.1 ℃) | 测试次数 | 6 次,自动取平均值 | 光源波长 | 589.3 nm(LED 冷光源 + 高精度干涉滤光片) | 零点校正 | 测定前后各 1 次(以溶剂作空白校正) |
3.3 测定步骤1. 开机预热,进入测量界面,选择“比旋度"测量模式,将样品室温度稳定控制在 20.0 ℃。 2. 以纯化水作空白校正,零点归零并记录空白值。 3. 用供试液冲洗旋光管 2~3 次,缓缓注满,管内不得有气泡;擦净管外壁后置入样品室,合上盖板。 4. 待读数稳定后记录旋光度,同法读取 6 次,取平均值。 5. 测定完毕再次以纯化水作空白校正,两次校正的旋光度差值超过 ±0.01° 时应重新测定。
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