1 前言 在食品的国家标准中 ,有关于还原糖的检测标准 ,检测出的还原糖的含量 ,有利于了解该类产品的含糖量 ,从而确定他的适用人群。 本实验中采用了上海佳航的JH-T6全自动电位滴定仪直接滴定法 ,在加热条件下 ,以次甲基蓝为指示剂 ,以已除去蛋白质的被测样品溶液 ,直接滴定已标定过的费林氏液 ,样品中的还原糖与斐林试剂中的酒石酸钾钠铜络合物反应 ,生成红色的氧化亚铜沉淀 ,氧化亚铜再与试剂中的亚铁氰化jia反应 ,生成可溶性化合物 ,到达终点时 ,稍过量的还原糖立即将次甲基蓝还原 ,使蓝色褪色 ,呈现出原样品溶液的颜色 ,即为终点。根据样品消耗体积 ,计算还原糖量。 该方法提升了实验的准确性以及实验的安全性 ,避免因为加热滴定所导致的烫伤 ,滴定效率大大提升 ,能自动判断终点 ,减少劳动量。 2 仪器和试剂 2.1 仪器 JH-T6全自动电位滴定仪 , 高温氧化还原电极 ,10mL 滴定管 ,电热板。 2.2 试剂 碱性酒石酸铜( 甲液) ,碱性酒石酸铜( 乙液) ,葡萄糖标准溶液( 1.0mg/mL ),亚铁氰化jia溶液(10.6%),乙酸锌溶液,盐酸( 1+ 1 ),冰乙酸。 3 实验方法 3.1 实验步骤 碱性酒石酸铜溶液的标定 : 1) 预备实验 :吸取碱性酒石酸铜溶液甲液和乙液各 5mL 于烧杯中 ,加入 10mL 水 ,玻璃 珠 5 颗 ,摇匀 ,在电炉上控制在 2min 内加热至沸 ,沸腾状态下用葡萄糖标准溶液滴定至终点。
2) 正式实验 :吸取碱性酒石酸铜溶液甲液和乙液各 5mL 于烧杯中 ,加入 10mL 水和比预 备实验少 1mL 的葡萄糖标准溶液 ,控制在 2min 内加热至沸 ,沸腾状态下用葡萄糖标准溶液滴定至终点。计算每 10mL 碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量。 3) 试样制备 :样品后取 20g 于 250mL 容量瓶中 ,加 100mL 水加热溶解 ,搅拌混匀 ,缓慢加入乙酸锌溶液 5mL 和亚铁氰化jia溶液 5mL ,加水定容至刻度 ,混匀静置 30min 后取上清液备用(或直接过滤)。用其代替葡萄糖标准溶液按上述标定的步骤重复操作 ,记录消耗试样的体积。 3.2 仪器参数 滴定模式 : | 动态滴定 | 最小添加体积 | 0.02mL | 电极平衡时间 : | 4s | 预搅拌时间 : | 10s | 电极平衡电位 : | 1mv | 滴定速度 : | 标准 | 结束体积 : | 20mL | 预滴定添加体积 | 0mL | 电位突跃量 : | 150 | 滴定前平衡电位 : | 10mv |
4 结果与讨论 4.1 实验数据 1. 标定碱性酒石酸铜溶液 : 编号 | 葡萄糖体积( mL ) | 还原糖含量(mg) | 平均含量(mg) | 1 | 10.727 | 10.727 | 10.768 | 2 | 10.810 | 10.810 | 3 | 10.768 | 10.768 |
2.还原糖含量测定 : 样品名称 | 取样量 ( g ) | 编号 | 滴定体积 ( mL ) | 平均滴定 体积( mL ) | 还原糖含量 (g/100g ) | 平均值 (g/100g ) | 鲜奶棒 | 19.8009 | 1 | 3.971 | 3.896 | 2.7014 | 2.7822 | 2 | 3.844 | 2.8458 | 3 | 3.873 | 2.7993 |
4.2 计算公式  X---样品中还原糖含量(以某种还原糖计) ,单位为克每百克( g/100g ); m1---碱性酒石酸铜溶液相当于某种还原糖的质量 ,单位为毫克( mg ) ; m---试样的质量 ,单位为克( g ); F---相当于某种糖的换算系数 ,这里选择的0.8 ; V ---滴定时平均消耗试样溶液的体积 ,单位为毫升( mL )。 250---定容体积 ,单位为毫升( mL ); 1000---换算系数。
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